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發(fā)布者: 發(fā)布時間:2022-05-07 19:35:05
DAPI染色液(即用型)
DAPI Stain Solution (Ready-to-use)
產(chǎn)品貨號:JY06011 規(guī)格:10 mL 銷售價格:¥100
產(chǎn)品貨號:JY06012 規(guī)格:50 mL 銷售價格:¥300
產(chǎn)品簡介
DAPI,即4’,6-聯(lián)脒-2-苯基吲哚二鹽酸鹽,4’,6-Diamidino-2-phenylindole, dihydrochloride,也稱DAPI dihydrochloride,分子式為C16H15N5·2HCl,分子量為350.25,CAS號28718-90-3。
DAPI是一種常用的可以穿透細胞膜的藍色熒光核酸染料,和雙鏈DNA結(jié)合后可以產(chǎn)生比自身強20多倍的熒光。和EB(ethidium bromide)相比,DAPI對雙鏈DNA的染色靈敏度要高很多倍。DAPI的更大激發(fā)波長為340 nm,更大發(fā)射波長為488 nm;DAPI和雙鏈DNA結(jié)合后,更大激發(fā)波長為358 nm,更大發(fā)射波長為461 nm。DAPI也可對RNA進行染色,染色機理是其可以選擇性嵌入“AU序列”并發(fā)出熒光。相比DAPI-dsDNA (Ex/Em=358 nm/461 nm),DAPI-RNA具有較長的更大發(fā)射波長(500 nm),其熒光亮度僅有DAPI-dsDNA的20%。盡管DAPI不能通過活細胞膜,但可以通過提高濃度使之進入活細胞。
DAPI具有很高的光漂白承受水平,能用來檢測酵母線粒體DNA,葉綠體DNA,病毒DNA,Microplasm DNA以及染色體DNA。DAPI典型的藍色熒光特性使其非常普遍的搭配其他綠色、黃色或紅色熒光染料用于細胞生物學(xué)多色熒光標(biāo)記技術(shù),因此也常作為核酸和染色體的復(fù)染劑用于細胞凋亡檢測、RNA原位雜交、直接或間接免疫檢測等領(lǐng)域,其染色后可用熒光顯微鏡觀察或流式細胞儀檢測。
本產(chǎn)品為溶液,分為2種形式,濃度為5 mg/mL和即用型,即用型產(chǎn)品可直接用于固定細胞或組織的細胞核染色。5 mg/mL DAPI需稀釋后使用。用于細胞核染色時,推薦的DAPI工作濃度為0.5-10 μg/mL。
保存條件
冰袋運輸,4℃避光保存,保質(zhì)期6個月;-20oC避光保存,至少1年有效。
注意事項
1.DAPI對人體有一定刺激性,請注意適當(dāng)防護。
2.熒光染料都存在淬滅的問題,建議染色后盡量當(dāng)天完成檢測。
3.為減緩熒光淬滅可以使用抗熒光淬滅封片液。
4.低濃度的DAPI不容易穿透細胞膜。
5.本產(chǎn)品僅用于科學(xué)研究,不得用于臨床診斷和治療,不得用于食品和藥品,不得存放于普通住宅內(nèi)。
6.為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。
使用說明
對于固定的細胞或組織樣品,固定后,適當(dāng)洗滌去除固定劑。DAPI染色通常在其他染色的最后進行。如果不需要進行其它染色,則直接進行DAPI染色。
1.對于貼壁細胞或組織切片:加入適量DAPI染色液,覆蓋住樣品即可。
對于懸浮細胞:至少加入樣本體積3倍的染色液,混勻。
2.室溫放置3-5 min。
3.吸除DAPI染色液,用TBST、PBS或生理鹽水洗滌2-3次,每次3-5 min。
4.直接在熒光顯微鏡下觀察或封片后熒光顯微鏡下觀察。激發(fā)波長360 nm,發(fā)射波長460 nm。細胞發(fā)生凋亡時,會看到凋亡細胞的細胞核呈致密濃染,或呈碎塊狀致密濃染。