南京江苑生物科技有限公司
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發(fā)布者: 發(fā)布時間:2022-05-04 09:38:12
PEG-8000慢病毒濃縮液
PEG-8000 Lentivirus Concentration Solution
產(chǎn)品貨號:JY03013 規(guī)格:50 mL 儲存:4 oC 銷售價格:¥ 500
產(chǎn)品貨號:JY03014 規(guī)格:100 mL 儲存:4 oC 銷售價格:¥ 900
PEG-8000慢病毒濃縮液為5×濃縮液,能對所有類型的慢病毒顆粒進(jìn)行簡單快速地濃縮。該濃縮液操作簡單,僅需將5×濃縮液與慢病毒上清按比例混合并短時間孵育,然后使用普通的離心機(jī)離心,即可獲得濃縮的慢病毒顆粒,回收率高達(dá)90%以上,可提高100倍病毒滴度。
為了加速科研進(jìn)程,江苑生物還提供細(xì)胞基因過表達(dá)、shRNA/siRNA介導(dǎo)的基因沉默、CRISPR/Cas9介導(dǎo)的基因敲除等服務(wù)。
保存條件
常溫配送。4 oC保存,1年有效。
注:瓶身標(biāo)記MFG為生產(chǎn)日期,因生化與分子試劑貯存得當(dāng),可用時間長于有效期,故標(biāo)出生產(chǎn)日期,方便提示試劑實(shí)際已貯存時間。
注意事項(xiàng)
1.本產(chǎn)品為無菌液,請注意無菌操作。
2.本產(chǎn)品僅用于科學(xué)研究。
3.為了您的安全和健康,請穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
使用說明
1.收集慢病毒上清液,0.45 μm濾膜過濾,以除去細(xì)胞和碎片。
注:如果使用濾膜過濾,只能使用低蛋白結(jié)合力的纖維素醋酸酯或聚醚砜(PES)膜,不能用硝酸纖維素膜(NC)。若沒有0.45 μm濾器,將上清3000 rpm,4 ℃離心5 min,棄沉淀亦可。若上清較多,可以1500 rpm離心5 min,將細(xì)胞及碎片離心到管底,再進(jìn)行過濾,防止堵塞濾器。過濾時,將注射器與濾器卡緊,輕柔推動活塞,防止用力過度造成濾器崩離注射器,使得病毒液四濺。
2.將慢病毒上清與濃縮液按照4:1的比例混合(上清液4份,濃縮液1份)4°C孵育過夜。剛開始時每隔30 min混勻一下,進(jìn)行3次。
注:若時間不寬裕,可將孵育時間縮短為幾小時。慢病毒顆粒在4 °C可以穩(wěn)定保存數(shù)天。
3.于4°C,水平轉(zhuǎn)子4000 g 離心25 min。
注:若使用角轉(zhuǎn)子,病毒會被離心到管壁上,需仔細(xì)分辨管壁上的白色沉淀并將其沖洗下來。
4.小心去除上清,不要晃動管子,一般可見白色沉淀(有時沉淀不可見)。
5.用初始體積(原上清液體積)1/10 - 1/100的DMEM或PBS重懸病毒顆粒,小心吹打均勻,重懸沉淀物。
注:病毒液一定要分裝,切忌反復(fù)凍融,凍融一次病毒滴度將降低20-60%。
慢病毒滴度測定方法參考http://www.jufukemao.com/news/xingyedongtai/179.html(江苑生物官網(wǎng)→新聞中心)